Clonage dans des vecteurs d’expression à partir de cDNA ou d’ADN génomique :

  Amplification par PCR de la construction désirée, clonage par restriction ou par recombinaison dans des vecteurs bactériens ;
  mini-préparation des vecteurs (Macherey-Nagel) ;
  les constructions peuvent être séquencées sur demande.

Constructions
  Vecteurs : dérivé de pET (NOVAGEN) ; pET9 - pET28 - pET21 (sites de restriction 5’ : NdeI, NcoI ou NheI respectivement). Clonage dans un site NotI en 3’.
  Système Gateway (sur demande)
  Marquage : His-Tag en C-terminal ou en N-terminal. deux options :

• Tag inclus dans l’amorce 3’.
• Tag après le site de restriction (introduisant 3 acides aminés supplémentaires).

Livraison : tous les clonages seront réalisés sur le robot de clonage MWG, et pour un fonctionnement optimal, groupés sur des plaques 96 puits. Le format de livraison des clones est variables et sera discuté préalablement avec le client.

Prix :

1. clonage avec amorces et séquençage : 300€/construction
2. clonage avec amorces seulement : 225€/construction
3. clonage avec séquençage seulement : 150€/construction
4. clonage seulement : 60€/construction

Contact : sophie.cheruel@egm.u-psud.fr